چگونه DNA میوه را از آن جدا کنیم؟- قسمت دوم
در قسمت قبل بخشی از انجام آزمایش جداسازی DNA میوه ارائه شد. در اینجا با انجام چند مرحله دیگر میتوانید DNA یک میوه را به طور کامل از آن جدا کرده و در یک لوله آزمایش مشاهده کنید.
مرحله سوم- خمیر کردن میوه
مواد لازم:
- 100 گرم موز (یا هر میوه دیگری مثل کیوی، سیب و ...)،
- چاقو،
- چنگال،
- تخته آشپزخانه،
- بشر یا لیوان 250 سی سی،
- ترازو آشپزخانه و
- قاشق چایخوری.
موز را روی تخته آشپزخانه با چنگال به صورت خمیری درآورید.
شکل1: نحوه خمیر کردن موز.
حال قابلمه را پر از آب کرده و روی اجاق قرار دهید و با دماسنج دمای آن را اندازهگیری کنید تا دمای آن به60oC برسد و کاسه بزرگ پلاستیکی را از آب و یخ پر کنید. پس از آن محلول جداسازی را که در مرحله دوم آماده کردید را به خمیر میوه اضافه کنید و آن را در قابلمه حاوی آب گرم بگذارید و در آن به مدت 15 دقیقه هم بزنید. پس از گذشت 15 دقیقه بشر را از قابلمه برداشته و در کاسه آب و یخ به مدت 5 دقیقه بگذارید. در این مدت بشر را با دست به آرامی تکان دهید تا محلول درون آن خوب هم بخورد.
شکل 2: اضافه کردن محلول جدا کننده بر خمیر میوه.
شکل 3: نحوه آرام هم زدن محلول در قابلمه.
مرحله چهارم- عبور از صافی
مواد لازم:
- کاسه پلاستیکی،
- الک،
- کاغذ صافی.
- مطابق شکل زیر بشر یا لیوان حاوی خمیر میوه و
محلول جدا کننده را از صافی عبور دهید.
شکل 4: چگونگی انجام مرحله چهارم.
تا اینجا توانستهاید دیواره هسته درون اتمهای میوه را بشکنید. اما DNA ها از پروتئین پوشیده شدهاند و برای جداسازی پروتئین از آنها همانند مرحله پنجم از میوهای استفاده میکنیم که آنزیم زیادی داشته باشد. در اینجا از آناناس استفاده شده است.
مرحله پنجم- جداسازی پروتئین
مواد لازم:
- مقداری آناناس،
- لوله آزمایش،
- یک عدد لیوان و
- سرنگ 5 سی سی بدون سوزن.
مطابق شکل آب آناناس را گرفته و در لیوانی ریخته و به مدت 2- 3 دقیقه با دست به آرامی لیوان را هم بزنید. سپس با سرنگ 1 سی سی از آن را به مادهی مرحله چهارم در یک لوله آزمایش اضافه کنید
شکل 6: نحوه اضاف کردن آب آناناس به محلول آماده شده در مرحله چهارم.
پس از جدا شدن DNA هسته اتمهای میوه باید آن را در مایعی که حلال خوبی برایش نیست ریخته تا ذرات DNA در آن به صورت معلق بماند و حل نشود. برای این کار از اتانول یا ایزوپروپیلی استفاده میکنیم که در ابتدای کار درون فریزر قرار داده شده تا کمی یخ زده باشد. اتانول یا ایزوپروپیل یخ زده را مانند شکل به DNA موجود در لوله آزمایش اضافه کنید.
شکل 7: اضافه کردن الکل یا ایزوپروپیل به DNA.
شکل 8: DNA جدا شده موز.